血管內皮細胞生長因子(VEGF)為近年發現一種與血管新生相關的多肽生長因子，能夠專一性及高效率促進血管內皮細胞的增生[1]。在本文章中將介紹VEGF常見的檢測方式。
VEGF的檢測方式有很多種，檢測VEGF含量的技術包含：免疫組織染色、放射免疫分析、西方墨點法以及ELISA分析。
免疫組織染色法 (Immunohistochemistry, IHC)
透過抗體辨識抗原進行專一性結合反應，偵測細胞或組織中是否有特定目標抗原的存在，並進一步分析其分佈及相對表現量，能夠用於偵測蛋白、核酸、多糖等[2]。
圖一、IHC簡單的操作過程及結果
放射免疫分析 (Radioimmunoassay, RIA)
RIA為透過放射線同位素標定的抗原和未標定的抗原(標準品抗原或待測抗原)，同時與數量有限的特異性抗體做競爭結合(競爭抗原抗體結合反應)，因此可以透過結合到抗體上的同位素標定抗原的多寡，反推待測抗原的數量[3]。
圖二、RIA簡單的操作過程
西方墨點法 (Western blot)
利用特定聚丙烯醯胺凝膠電泳區分蛋白大小後，再透過特定抗體專一性結合其抗原蛋白進行呈色，分析分子大小及呈色結果，可以得到蛋白的相對定量[4]。
圖三、西方墨點法的原理及結果
酵素結合免疫吸附分析法 (Enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)
ELISA主要利用抗體間的特異性結合，進行檢體的檢測，其反應主要結合於固體承載物上(大多為塑膠孔盤)，接著再進行酵素呈色系統及標準曲線來分析特定抗體或抗原的含量。ELISA根據不同的檢測對象及目的可分為主要三種檢測方式：三明治法（sandwich）、間接法（indirect）、以及競爭法（Competitive）[5]。
---三明治法常用於檢測大分子抗原(如：VEGF)
---間接法常用於檢測抗體
---競爭法是一種較少用到的ELISA檢測機制(用於檢測小分子)
以三明治法簡單介紹其原理及操作：
將具有專一性的VEGF抗體固著於塑膠孔盤上，接著再將多餘的抗體洗去，接著個別加入序列稀釋後的待測物及已知濃度的標準品(做標準曲線)，待抗體與抗原進行專一性反應後洗去多餘檢體，再加入另一種專一性VEGF的抗體，反應後洗去多餘抗體，接著再加入帶有酵素的二級抗體，最後再透過酵素呈色。將得到的檢體吸光值帶入標準曲線後即可推算出檢體中的VEGF含量。
圖四、ELISA簡單的操作過程及結果
以上為VEGF的檢測方法，其中又以ELISA最為常用，其優點為快速、簡便、靈敏度高，於臨床上能快速診斷，另外也有自動化的儀器，增加在臨床的應用性。
參考資料：
1. http://www.maydeal.com/books/PptDownLoad-84630-5558.html
2. 免疫組織化學 (維基百科) https://goo.gl/OUx4p9
3. 放射免疫分析 (維基百科) https://goo.gl/8Btp2E
4. 西方墨點法 (維基百科) https://goo.gl/P4GgZQ
5. 酵素結合免疫吸附分析法 (維基百科) https://goo.gl/xubrci
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